Nature.com گهمڻ لاءِ توهان جي مهرباني. برائوزر جو نسخو توهان استعمال ڪري رهيا آهيو محدود CSS سپورٽ آهي. بھترين نتيجن لاءِ، اسان ھڪڙو نئون برائوزر استعمال ڪرڻ جي صلاح ڏيو ٿا (يا انٽرنيٽ ايڪسپلورر ۾ مطابقت واري موڊ کي غير فعال ڪرڻ). ساڳئي وقت ۾، مسلسل حمايت کي يقيني بڻائڻ لاء، اسان سائيٽ کي بغير اسٽائل ۽ جاوا اسڪرپٽ ڏيکارينداسين.
موڊڪ تبديلي جي جانورن جي ماڊل جو قيام (ايم سي) ايم سي جي مطالعي لاء هڪ اهم بنياد آهي. 54 نيوزيلينڊ سفيد خرگوش شيام آپريشن گروپ، عضلات امپلانٽيشن گروپ (ايم اي گروپ) ۽ نيوڪليس پلپوسس امپلانٽيشن گروپ (اين پي اي گروپ) ۾ ورهايل هئا. NPE گروپ ۾، intervertebral ڊسڪ anterolateral lumbar جراحي طريقي سان بي نقاب ڪيو ويو ۽ آخر پليٽ جي ويجھو L5 vertebral جسم کي پنڪچر ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو. NP ڪڍيو ويو L1/2 intervertebral ڊسڪ مان هڪ سرنج ذريعي ۽ ان ۾ انجيل ڪيو ويو. subchondral bone ۾ سوراخ ڪرڻ. جراحتي طريقا ۽ سوراخ ڪرڻ جا طريقا عضلاتي امپلانٽيشن گروپ ۽ شم-آپريشن گروپ ۾ ساڳيا هئا جيڪي NP امپلانٽيشن گروپ ۾ آهن. ايم اي گروپ ۾، عضلات جو هڪ ٽڪرو سوراخ ۾ رکيل هو، جڏهن ته شمع آپريشن گروپ ۾، سوراخ ۾ ڪجھ به نه رکيو ويو. آپريشن کانپوءِ ايم آر آئي اسڪيننگ ۽ ماليڪيولر بايولوجيڪل ٽيسٽ ڪئي وئي. اين پي اي گروپ ۾ سگنل تبديل ٿي ويو، پر شمع-آپريشن گروپ ۽ ايم گروپ ۾ ڪو به واضح سگنل تبديل نه ڪيو ويو. هسٽولوجيڪل مشاهدو ڏيکاريو ويو ته غير معمولي ٽائيسو جي ڦهلائڻ جو مشاهدو ڪيو ويو امپلانٽيشن سائيٽ تي، ۽ اين پي اي گروپ ۾ IL-4، IL-17 ۽ IFN-γ جو اظهار وڌايو ويو. NP کي subchondral bone ۾ implantation ڪري سگھي ٿو MC جو جانورن جو نمونو.
موڊڪ تبديليون (MC) vertebral endplates ۽ ڀرپاسي واري بون ميرو جا زخم آهن جيڪي مقناطيسي گونج اميجنگ (MRI) تي نظر اچن ٿا. اهي لاڳاپيل علامتن سان ماڻهن ۾ ڪافي عام آهن1. ڪيترن ئي مطالعي تي زور ڏنو آهي ايم سي جي اهميت جي ڪري ان جي وابستگي جي ڪري گهٽ پوئتي درد (LBP) 2,3. de Roos et al.4 ۽ موڊيڪ ۽ ٻيا. موڊڪ قسم I تبديليون T1-وزن ٿيل (T1W) ترتيبن تي hypointense ۽ T2-weighted (T2W) تسلسل تي hyperintense آھن. هي زخم بون ميرو ۾ فشر اينڊ پليٽس ۽ ڀرسان ويسولر گرينوليشن ٽشو کي ظاهر ڪري ٿو. موڊڪ قسم II تبديليون ٻنهي T1W ۽ T2W ترتيبن تي اعلي سگنل ڏيکاري ٿو. هن قسم جي زخم ۾، آخري پليٽ تباهي ملي سگهي ٿي، انهي سان گڏ هسٽولوجيڪل فٽٽي متبادل هڏن جي ميرو جي ڀرسان. موڊڪ قسم III تبديليون T1W ۽ T2W ترتيبن ۾ گهٽ سگنل ڏيکاري ٿو. آخري تختن سان لاڳاپيل Sclerotic زخم ڏٺا ويا 6. ايم سي کي اسپائن جي پيٽولوجيڪل بيماري سمجهيو ويندو آهي ۽ 7,8,9 جي اسپائن جي ڪيترن ئي خراب ٿيندڙ بيمارين سان ويجهي سان لاڳاپيل آهي.
دستياب ڊيٽا تي غور ڪندي، ڪيترن ئي مطالعي ۾ ايم سي جي ايٽولوجي ۽ پيٽولوجيڪل ميکانيزم ۾ تفصيلي بصيرت ڏني وئي آهي. Albert et al. تجويز ڪيو ويو آهي ته ايم سي ڊسڪ هرنيشن 8 جي سبب ٿي سگهي ٿي. Hu et al. منسوب ٿيل MC کي سخت ڊسڪ جي زوال 10. ڪروڪ "اندروني ڊسڪ رپچر" جو تصور پيش ڪيو، جنهن ۾ چيو ويو آهي ته بار بار ڊسڪ سورن جي آخري پليٽ ۾ مائڪروٽيئرز جي ڪري سگھي ٿي. ڦاٽن جي ٺهڻ کان پوءِ، نيوڪليس پلپوسس (NP) جي آخري پليٽ تباهي آٽو ميميون ردعمل پيدا ڪري سگهي ٿي، جيڪو اڳتي هلي MC11 جي ترقيءَ جو سبب بڻجي ٿو. Ma et al. هڪ اهڙو ئي نظريو ورهايو ۽ ٻڌايو ته NP-induced autoimmunity MC12 جي pathogenesis ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿي.
مدافعتي نظام جي سيلز، خاص طور تي CD4 + T مددگار lymphocytes، autoimmunity 13 جي pathogenesis ۾ اهم ڪردار ادا ڪن ٿا. تازو دريافت ٿيل Th17 سبسيٽ proinflammatory cytokine IL-17 پيدا ڪري ٿو، ڪيموڪائن جي اظهار کي فروغ ڏئي ٿو، ۽ IFN-γ14 پيدا ڪرڻ لاءِ خراب ٿيل عضون ۾ ٽي سيلز کي متحرڪ ڪري ٿو. Th2 سيلز پڻ مدافعتي ردعمل جي pathogenesis ۾ هڪ منفرد ڪردار ادا ڪن ٿا. IL-4 جو اظهار هڪ نمائندي Th2 سيل جي طور تي ڪري سگھي ٿو شديد امونپيٿولوجيڪل نتيجا15.
جيتوڻيڪ MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 تي ڪيترائي ڪلينڪ اڀياس ڪيا ويا آهن، اڃا تائين مناسب جانورن جي تجرباتي ماڊلن جي کوٽ آهي جيڪا MC پروسيس کي نقل ڪري سگهي ٿي جيڪا اڪثر انسانن ۾ ٿيندي آهي ۽ ٿي سگهي ٿي. ايٽولوجي جي تحقيق ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويو يا نئين علاج جهڙوڪ ٽارگيٽ علاج. اڄ تائين، ايم سي جي صرف چند جانورن جي ماڊل کي ٻڌايو ويو آهي ته بنيادي پيٽولوجيڪل ميڪانيزم جو مطالعو ڪيو وڃي.
البرٽ ۽ ما پاران تجويز ڪيل آٽو ايميون نظريي جي بنياد تي، هن مطالعي هڪ سادي ۽ ٻيهر پيدا ٿيندڙ خرگوش MC ماڊل قائم ڪيو آٽو ٽرانسپلانٽنگ NP ذريعي سوراخ ڪيل ورٽيبرل آخر پليٽ جي ويجهو. ٻيا مقصد آهن جانورن جي ماڊل جي هسٽولوجي خاصيتن جو مشاهدو ڪرڻ ۽ ايم سي جي ترقي ۾ اين پي جي مخصوص ميڪانيزم جو جائزو وٺڻ. ان جي نتيجي ۾، اسان ٽيڪنالاجي استعمال ڪندا آهيون جهڙوڪ ماليڪيولر بائيولوجي، ايم آر آئي، ۽ هسٽولوجي اڀياس MC جي ترقي جي مطالعي لاء.
ٻه خرگوش سرجري دوران رت وهڻ سبب مري ويا، ۽ چار خرگوش ايم آر آئي دوران بيهڻ سبب فوت ٿي ويا. باقي 48 خرگوش بچيا ۽ سرجري کان پوء ڪو به رويي يا اعصابي نشانيون نه ڏيکاريا.
ايم آر آئي ڏيکاري ٿو ته مختلف سوراخ ۾ شامل ٿيل ٽشو جي سگنل جي شدت مختلف آهي. اين پي اي گروپ ۾ L5 ورٽيبرل جسم جي سگنل جي شدت 12، 16 ۽ 20 هفتن ۾ داخل ٿيڻ کان پوءِ آهستي آهستي تبديل ٿي وئي (T1W تسلسل گهٽ سگنل ڏيکاريو، ۽ T2W تسلسل مخلوط سگنل ۽ گهٽ سگنل ڏيکاريو) (تصوير 1C)، جڏهن ته ايم آر آئي ظاهر ٿئي ٿي. سرايت ٿيل حصن جي ٻين ٻن گروپن جي ساڳئي عرصي دوران نسبتا مستحڪم رهي (تصوير. 1A، B).
(الف) 3 ٽائيم پوائنٽس تي خرگوش لمبر اسپائن جي نمائندي ترتيب وار ايم آر آئي. شمع آپريشن گروپ جي تصويرن ۾ ڪوبه سگنل غير معمولي نه مليا. (B) ME گروپ ۾ vertebral جسم جا سگنل خاصيتون جيڪي شيام-آپريشن گروپ ۾ آهن، ۽ وقت سان گڏ شامل ٿيڻ واري سائيٽ تي ڪا خاص سگنل تبديلي نه ٿيندي آهي. (سي) اين پي اي گروپ ۾، گهٽ سگنل واضح طور تي T1W تسلسل ۾ نظر اچن ٿا، ۽ مخلوط سگنل ۽ گهٽ سگنل واضح طور تي T2W تسلسل ۾ نظر اچن ٿا. 12-هفتي جي عرصي کان وٺي 20-هفتي جي عرصي تائين، اسپوراڊڪ اعلي سگنلن جي چوڌاري گهٽ سگنلن جي چوڌاري T2W تسلسل ۾ گهٽتائي ٿي.
واضح هڏن جي هائيپرپلاسيا NPE گروپ ۾ ورٽيبرل باڊي جي امپلانٽيشن سائيٽ تي ڏسي سگھجي ٿو، ۽ هڏن جو هائيپرپلاسيا 12 کان 20 هفتا (Fig. 2C) NPE گروپ جي مقابلي ۾ تيزيءَ سان ٿئي ٿو، ماڊل ڪيل ورٽيبرل ۾ ڪا خاص تبديلي نظر نه ٿي اچي. لاش شام گروپ ۽ ايم گروپ (تصوير 2C) 2A، B).
(الف) ورٽيبرل جسم جي مٿاڇري تي لڳل حصي تي تمام هموار آهي، سوراخ چڱيءَ طرح ڀرجي ٿو، ۽ ورٽيبرل جسم ۾ ڪو به هائپرپلاسيا نه آهي. (ب) ايم اي گروپ ۾ امپلانٽ ٿيل سائيٽ جي شڪل شيام آپريشن گروپ جي شڪل سان ملندڙ جلندڙ آهي، ۽ وقت سان گڏ امپلانٽ ٿيل سائيٽ جي ظاهر ۾ ڪا به واضح تبديلي ناهي. (سي) اين پي اي گروپ ۾ امپلانٽ ٿيل سائيٽ تي هڏن جي هائپرپلاسيا واقع ٿي. هڏن جو هائيپرپلاسيا تيزيءَ سان وڌيو ۽ ان کان به وڌي ويو ته انٽرورٽيبرل ڊسڪ ذريعي ڪنٽرالٽرل ورٽيبرل جسم تائين.
هسٽولوجيڪل تجزيو هڏن جي ٺهڻ بابت وڌيڪ تفصيلي ڄاڻ فراهم ڪري ٿو. شڪل 3 H&E سان داغ ٿيل پوسٽ آپريٽو سيڪشن جون تصويرون ڏيکاري ٿو. شمع-آپريشن گروپ ۾، chondrocytes چڱي طرح ترتيب ڏني وئي ۽ سيل جي واڌاري کي معلوم نه ڪيو ويو (Fig. 3A). ايم اي گروپ جي صورتحال شام-آپريشن گروپ ۾ (تصوير 3B) جهڙي هئي. جڏهن ته، اين پي اي گروپ ۾، وڏي تعداد ۾ chondrocytes ۽ NP-جهڙي سيلن جي ڦهلائڻ جو مشاهدو ڪيو ويو امپلانٽيشن سائيٽ تي (تصوير 3C)؛
(الف) Trabeculae کي آخري پليٽ جي ويجھو ڏسي سگھجي ٿو، chondrocytes صاف طور تي ترتيب ڏنل آھن يونيفارم سيل جي سائيز ۽ شڪل سان ۽ ڪو به واڌارو (40 ڀيرا). (ب) ايم اي گروپ ۾ امپلانٽيشن سائيٽ جي حالت شيام گروپ جي برابر آهي. Trabeculae ۽ chondrocytes ڏسي سگهجن ٿا، پر امپلانٽيشن سائيٽ تي ڪو به واضح واڌارو نه آهي (40 ڀيرا). (ب) اهو ڏسي سگهجي ٿو ته chondrocytes ۽ NP-جهڙوڪ سيلز وڏي پيماني تي وڌندا آهن، ۽ chondrocytes جي شڪل ۽ سائيز اڻ برابر (40 ڀيرا) آهن.
interleukin 4 (IL-4) mRNA، interleukin 17 (IL-17) mRNA، ۽ interferon γ (IFN-γ) mRNA ٻنهي NPE ۽ ME گروپن ۾ ڏٺو ويو. جڏهن ٽارگيٽ جينس جي اظهار جي سطحن جو مقابلو ڪيو ويو، IL-4، IL-17، ۽ IFN-γ جي جين جو اظهار خاص طور تي اين پي اي گروپ ۾ ايم اي گروپ ۽ شميم آپريشن گروپ جي مقابلي ۾ وڌايو ويو (تصوير 4) (P <0.05). شمع آپريشن گروپ جي مقابلي ۾، ايم اي گروپ ۾ IL-4، IL-17، ۽ IFN-γ جي اظهار جي سطح صرف ٿورڙي وڌي وئي ۽ شمارياتي تبديلي تائين پهچي نه سگهيو (P > 0.05).
اين پي اي گروپ ۾ IL-4، IL-17 ۽ IFN-γ جي ايم آر اين اي جو اظهار هڪ خاص طور تي اعلي رجحان ڏيکاري ٿو انهن جي ڀيٽ ۾ شمع آپريشن گروپ ۽ ايم گروپ (P <0.05).
ان جي ابتڙ، ايم گروپ ۾ اظهار جي سطح ۾ ڪو خاص فرق نه ڏيکاريو ويو (P> 0.05).
IL-4 ۽ IL-17 جي خلاف تجارتي طور تي دستياب اينٽي باڊيز استعمال ڪندي مغربي بلٽ جو تجزيو ڪيو ويو تبديل ٿيل mRNA ايڪسپريشن جي نموني جي تصديق ڪرڻ لاءِ. جيئن ته شڪل 5A، B ۾ ڏيکاريل آهي، ايم اي گروپ ۽ شمع آپريشن گروپ جي مقابلي ۾، اين پي اي گروپ ۾ IL-4 ۽ IL-17 جي پروٽين جي سطح خاص طور تي وڌي وئي (P <0.05). شمع آپريشن گروپ جي مقابلي ۾، ايم اي گروپ ۾ IL-4 ۽ IL-17 جي پروٽين جي سطح پڻ شمارياتي طور تي اهم تبديلين تائين پهچڻ ۾ ناڪام ٿي ويا (P> 0.05).
(الف) اين پي اي گروپ ۾ IL-4 ۽ IL-17 جي پروٽين جي سطح خاص طور تي ME گروپ ۽ placebo گروپ (P <0.05) جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ آھن. (ب) مغربي بلٽ هسٽوگرام.
سرجري جي دوران حاصل ڪيل انساني نمونن جي محدود تعداد جي ڪري، ايم سي جي روگجنن تي واضح ۽ تفصيلي مطالعو ڪجهه ڏکيو آهي. اسان ڪوشش ڪئي ته ايم سي جي جانورن جي ماڊل کي ان جي امڪاني پيٽولوجيڪل ميڪانيزم جو مطالعو ڪرڻ لاء. ساڳئي وقت، ريڊيوولوجيڪل تشخيص، هسٽولوجيڪل تشخيص ۽ سالمياتي حياتياتي تشخيص اين پي آٽوگرافٽ پاران ايم سي جي ڪورس جي پيروي ڪرڻ لاء استعمال ڪيا ويا. نتيجي طور، اين پي امپلانٽيشن ماڊل جي نتيجي ۾ سگنل جي شدت ۾ 12-هفتي کان 20-هفتي وقت جي پوائنٽن ۾ بتدريج تبديلي آئي (T1W تسلسل ۾ مخلوط گهٽ سگنل ۽ T2W تسلسل ۾ گهٽ سگنل)، ٽشو تبديلين جو اشارو، ۽ هسٽولوجيڪل ۽ ماليڪيولر. حياتياتي اڀياس ريڊيالوجيڪل مطالعي جي نتيجن جي تصديق ڪئي.
ھن تجربن جا نتيجا ڏيکاريا آھن ته بصري ۽ هسٽولوجي تبديليون اين پي اي گروپ ۾ vertebral جسم جي خلاف ورزي جي سائيٽ تي واقع ٿي. ساڳئي وقت، IL-4، IL-17 ۽ IFN-γ جين جو اظهار، گڏوگڏ IL-4، IL-17 ۽ IFN-γ جو مشاهدو ڪيو ويو، ظاهر ڪيو ويو ته vertebral ۾ autologous nucleus pulposus tissue جي خلاف ورزي. جسم سگنل ۽ morphological تبديلين جو هڪ سلسلو سبب ڪري سگهو ٿا. اهو ڳولڻ آسان آهي ته جانورن جي ماڊل جي vertebral جسمن جي سگنل جون خاصيتون (T1W تسلسل ۾ گهٽ سگنل، مخلوط سگنل ۽ T2W تسلسل ۾ گهٽ سگنل) انساني ورٽيبرل سيلز سان بلڪل ملندڙ جلندڙ آهن، ۽ ايم آر آئي خاصيتون پڻ. هسٽولوجي ۽ گراس اناتومي جي مشاهدن جي تصديق ڪن ٿا، يعني vertebral جسم جي سيلن ۾ تبديليون ترقي پسند آهن. جيتوڻيڪ شديد صدمي جي ڪري سوزش واري ردعمل پنڪچر کان پوءِ جلد ئي ظاهر ٿي سگهي ٿي، ايم آر آئي جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته ترقي يافته سگنل تبديليون پنڪچر کان 12 هفتا پوءِ ظاهر ٿيون ۽ 20 هفتا تائين برقرار رهيون آهن بغير ڪنهن وصولي يا ايم آر آئي تبديلين جي واپسي جي نشانين جي. انهن نتيجن جو مشورو ڏنو ويو آهي ته آٽولوگس vertebral NP خرگوش ۾ ترقي پسند MV قائم ڪرڻ لاء هڪ قابل اعتماد طريقو آهي.
ھن پنڪچر ماڊل کي مناسب مهارت، وقت، ۽ جراحي ڪوشش جي ضرورت آھي. ابتدائي تجربن ۾، پارورٽيبرل لئگيمينٽس ڍانچي جي انتشار يا زيادتي محرڪ شايد vertebral osteophytes جي ٺهڻ جي نتيجي ۾. خيال رکڻ گهرجي ته ڀرسان ڊسڪ کي نقصان يا خارش نه ڪرڻ گهرجي. جيئن ته هڪجهڙائي ۽ ٻيهر پيدا ٿيندڙ نتيجا حاصل ڪرڻ لاءِ دخول جي کوٽائي کي ڪنٽرول ڪرڻ لازمي آهي، ان ڪري اسان دستي طور تي 3 ملي ميٽر ڊگھي سوئي جي شيٽ کي ڪٽي هڪ پلگ ٺاهيو. ھن پلگ کي استعمال ڪندي vertebral جسم ۾ يونيفارم سوراخ ڪرڻ جي کوٽائي کي يقيني بڻائي ٿي. ابتدائي تجربن ۾، آپريشن ۾ شامل ٽن آرٿوپيڊڪ سرجنن ڏٺو ته 16 گيج سوئي 18 گيج جي سوئي يا ٻين طريقن سان ڪم ڪرڻ آسان آھي. ڊرلنگ دوران وڌيڪ رت وهڻ کان بچڻ لاءِ، سوئي کي ٿوري دير لاءِ رکڻ سان وڌيڪ موزون انٽريشن هول مهيا ٿيندو، جنهن مان معلوم ٿئي ٿو ته MC جي هڪ خاص درجي کي هن طريقي سان ڪنٽرول ڪري سگهجي ٿو.
جيتوڻيڪ ڪيترن ئي مطالعي ۾ ايم سي کي نشانو بڻايو ويو آهي، ٿورڙي ڄاڻ آهي MC25,26,27 جي etiology ۽ pathogenesis بابت. اسان جي پوئين مطالعي جي بنياد تي، اسان اهو محسوس ڪيو ته خودمختاري MC12 جي واقعن ۽ ترقي ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿي. هن مطالعي ۾ IL-4، IL-17، ۽ IFN-γ جي مقداري اظهار جي جانچ ڪئي وئي، جيڪي اينٽيجن جي محرک کان پوءِ CD4+ سيلز جا بنيادي فرق جا رستا آهن. اسان جي مطالعي ۾، منفي گروپ جي مقابلي ۾، اين پي اي گروپ IL-4، IL-17، ۽ IFN-γ جو اعلي اظهار ڪيو، ۽ IL-4 ۽ IL-17 جي پروٽين جي سطح پڻ اعلي هئي.
ڪلينڪ طور تي، IL-17 mRNA ايڪسپريس اين پي سيلز ۾ مريضن جي ڊسڪ هرنيشن 28 سان وڌي وئي آهي. وڌيل IL-4 ۽ IFN-γ اظهار جي سطح پڻ مليا ويا ھڪڙو سخت غير کمپريشن ڊسڪ ھينيئر ماڊل ۾ صحتمند ڪنٽرولن جي مقابلي ۾ 29. IL-17 سوزش ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو، آٽيميون بيمارين ۾ ٽشوز جي زخم 30 ۽ IFN-γ31 جي مدافعتي ردعمل کي وڌائي ٿو. وڌايو ويو IL-17-ثالث ٿيل ٽشو زخم MRL/lpr mice32 ۽ autoimmunity-susceptible mice33 ۾ ٻڌايو ويو آهي. IL-4 proinflammatory cytokines جي اظهار کي روڪي سگھي ٿو (جهڙوڪ IL-1β ۽ TNFα) ۽ macrophage activation34. اهو ٻڌايو ويو آهي ته IL-4 جو mRNA اظهار اين پي اي گروپ ۾ IL-17 ۽ IFN-γ جي مقابلي ۾ مختلف هو ساڳئي وقت پوائنٽ؛ اين پي اي گروپ ۾ IFN-γ جو mRNA اظهار ٻين گروپن جي ڀيٽ ۾ خاص طور تي وڌيڪ هو. تنهن ڪري، IFN-γ جي پيداوار شايد اين پي جي مداخلت پاران متاثر ٿيندڙ سوزش واري ردعمل جو ثالث ٿي سگهي ٿو. اڀياس ڏيکاريا آهن ته IFN-γ ڪيترن ئي سيلن جي قسمن جي ذريعي پيدا ڪئي وئي آهي، جن ۾ چالو ٿيل قسم 1 مددگار ٽي سيلز، قدرتي قاتل سيلز، ۽ ميڪروفيجز 35,36 شامل آهن، ۽ هڪ اهم پرو سوزش واري سائيٽوڪائن آهي جيڪو مدافعتي ردعمل کي فروغ ڏئي ٿو.
هن مطالعي مان معلوم ٿئي ٿو ته آٽوميميون ردعمل ايم سي جي واقعن ۽ ترقي ۾ شامل ٿي سگھي ٿو. Luoma et al. معلوم ٿيو ته ايم سي ۽ ممتاز اين پي جا سگنل خاصيتون ايم آر آئي تي هڪجهڙا آهن، ۽ ٻئي T2W sequence38 ۾ اعليٰ سگنل ڏيکارين ٿا. ڪجهه سيٽوڪائنز جي تصديق ڪئي وئي آهي ته MC جي واقعن سان ويجهي سان لاڳاپيل آهي، جهڙوڪ IL-139. Ma et al. تجويز ڪيو ويو آهي ته NP جي مٿي يا هيٺئين طرف وڌڻ جو MC12 جي واقعن ۽ ترقي تي وڏو اثر پئجي سگھي ٿو. Bobechko40 ۽ Herzbein et al.41 ٻڌايو ته NP ھڪڙو مدافعتي ٽشو آھي جيڪو ڄمڻ کان وٺي ويسولر گردش ۾ داخل نٿو ڪري سگھي. NP protrusions غير ملڪي جسمن کي رت جي فراهمي ۾ متعارف ڪرايو، ان ڪري مقامي آٽيميون رد عمل 42 جي وچ ۾. خودڪار مدافعتي رد عمل وڏي تعداد ۾ مدافعتي عنصر پيدا ڪري سگھن ٿا، ۽ جڏهن اهي عنصر مسلسل بافتن جي سامهون هوندا آهن، اهي سگنلنگ 43 ۾ تبديلي آڻي سگهن ٿا. هن مطالعي ۾، IL-4، IL-17 ۽ IFN-γ جي اوور ايڪسپريشن عام مدافعتي عنصر آهن، وڌيڪ ثابت ڪن ٿا NP ۽ MCs44 جي وچ ۾ ويجهي تعلق. هي جانور ماڊل چڱي طرح اين پي جي ڪاميابي ۽ آخري پليٽ ۾ داخل ٿيڻ کي نقل ڪري ٿو. اهو عمل وڌيڪ ظاهر ڪيو ايم سي تي خودمختاري جو اثر.
جيئن توقع ڪئي وئي، هي جانور ماڊل اسان کي ايم سي پڙهڻ لاء هڪ ممڪن پليٽ فارم فراهم ڪري ٿو. بهرحال، هن ماڊل ۾ اڃا به ڪجهه حدون آهن: پهريون، جانورن جي مشاهدي واري مرحلي دوران، ڪجهه وچولي-اسٽيج خرگوش کي هسٽولوجيڪل ۽ ماليڪيولر حياتيات جي جاچ لاءِ ايٿانائيز ڪرڻ جي ضرورت آهي، تنهنڪري ڪجهه جانور وقت سان گڏ ”استعمال کان ٻاهر“ ٿي ويندا آهن. ٻيو، جيتوڻيڪ هن مطالعي ۾ ٽي ٽائيم پوائنٽ مقرر ڪيا ويا آهن، بدقسمتي سان، اسان صرف هڪ قسم جي MC (Modic type I change) کي ماڊل ڪيو آهي، تنهنڪري اهو انساني بيماري جي ترقي جي عمل جي نمائندگي ڪرڻ لاء ڪافي ناهي، ۽ وڌيڪ وقت پوائنٽ مقرر ڪرڻ جي ضرورت آهي. بهتر طور تي سڀني سگنلن جي تبديلين جو مشاهدو ڪريو. ٽيون، بافتن جي جوڙجڪ ۾ تبديليون حقيقت ۾ هسٽولوجي داغ جي ذريعي واضح طور تي ظاهر ڪري سگهجن ٿيون، پر ڪجهه خاص ٽيڪنالاجي هن ماڊل ۾ مائڪرو ساختماني تبديلين کي بهتر طور تي ظاهر ڪري سگهن ٿيون. مثال طور، پولرائزڊ لائٽ خوردبيني استعمال ڪيو ويو ته خرگوش intervertebral discs45 ۾ fibrocartilage جي ٺهڻ جو تجزيو ڪرڻ لاء. MC ۽ endplate تي NP جي ڊگھي مدت اثرات وڌيڪ مطالعي جي ضرورت آھي.
54-4 مرد نيوزي لينڊ اڇا خرگوش (وزن اٽڪل 2.5-3 ڪلوگرام، عمر 3-3.5 مهينا) بي ترتيب طور تي شيام آپريشن گروپ، عضلات امپلانٽيشن گروپ (ايم اي گروپ) ۽ اعصاب روٽ امپلانٽيشن گروپ (اين پي اي گروپ) ۾ ورهايل هئا. Tianjin اسپتال جي اخلاقي ڪميٽي پاران سڀ تجرباتي طريقا منظور ڪيا ويا، ۽ تجرباتي طريقا منظور ٿيل هدايتن جي مطابق سختي سان ڪيا ويا.
S. Sobajima 46 جي جراحي ٽيڪنڪ ۾ ڪجهه سڌارا ڪيا ويا آهن. هر خرگوش کي پوئتي موٽڻ واري پوزيشن ۾ رکيو ويو ۽ پنجن لڳاتار لمبر انٽرورٽيبرل ڊسڪ (IVDs) جي اڳئين سطح کي پوسٽروليٽرل ريٽروپيريٽونيل طريقي سان استعمال ڪيو ويو. هر خرگوش کي جنرل اينسٿيزيا ڏنو ويو (20٪ urethane، 5 ml/kg کان جي رگ ذريعي). رٻڙ جي هيٺين ڪنڊ کان پيلوِڪ برِم تائين، 2 سينٽي ويڪر تائين پيرورٽيبرل عضلات تائين هڪ ڊگهو چمڙي جو چيرا ٺاهيو ويو هو. L1 کان L6 تائين ساڄي انٽرولٽرل اسپائن کي اوورلينگ ذيلي ذيلي بافتو، ريٽروپيريٽونيل ٽشو، ۽ عضلات (تصوير 6A) جي تيز ۽ بلنٽ ڊسڪشن ذريعي بي نقاب ڪيو ويو. ڊسڪ جي سطح pelvic برم کي استعمال ڪندي طئي ڪيو ويو ته L5-L6 ڊسڪ ليول لاءِ ائٽمياتي نشان جي طور تي. L5 ورٽيبرا جي آخري پليٽ جي ويجھو 3 ملي ميٽر جي اونهائي تائين سوراخ ڪرڻ لاءِ 16 گيج جي پنڪچر سوئي استعمال ڪريو (تصوير 6B). L1-L2 intervertebral ڊسڪ (Fig. 6C) ۾ آٽولوگس نيوڪليس پلپوسس کي ختم ڪرڻ لاءِ 5-ml سرنج استعمال ڪريو. هر گروهه جي ضرورتن مطابق نيوڪليس پلپوسس يا عضلات کي هٽايو. ڊرل هول کي اونڌو ڪرڻ کان پوءِ، جذبي جا سُوچر گہرے فاشيا، سطحي فاشيا ۽ چمڙي تي رکيا ويندا آهن، ان ڳالهه جو خيال رکندي سرجري دوران vertebral جسم جي periosteal ٽشو کي نقصان نه پهچندي.
(الف) L5-L6 ڊسڪ هڪ پوسٽروليٽرل ريٽروپيريٽونيل طريقي سان ظاهر ڪيو ويو آهي. (ب) L5 جي آخر واري پليٽ جي ويجهو سوراخ ڪرڻ لاءِ 16 گيج جي سوئي استعمال ڪريو. (سي) آٽولوگس MFs حاصل ڪيا ويا آهن.
20% urethane (5 ml/kg) سان جنرل اينٿيسيا جو انتظام ڪن جي رڳن ذريعي ڪيو ويو، ۽ lumbar spine radiographs کي 12، 16، ۽ 20 هفتا آپريشن کان پوءِ بار بار ڪيو ويو.
سرجري کان پوءِ 12، 16 ۽ 20 هفتا تي ketamine (25.0 mg/kg) ۽ intravenous sodium pentobarbital (1.2 g/kg) جي intramuscular انجيڪشن ذريعي خرگوش کي قربان ڪيو ويو. هسٽولوجيڪل تجزيي لاء سڄي اسپائن کي هٽايو ويو ۽ حقيقي تجزيو ڪيو ويو. مقداري ريورس ٽرانسپشن (RT-qPCR) ۽ مغربي بلٽنگ استعمال ڪيا ويا مدافعتي عوامل ۾ تبديلين کي ڳولڻ لاء.
ايم آر آئي جا امتحان خرگوش ۾ ڪيا ويا 3.0 T ڪلينڪ مقناطيس استعمال ڪندي (GE ميڊيڪل سسٽم، فلورنس، SC) آرٿوگونل لمب ڪوئل رسيور سان ليس. خرگوش کي 20٪ urethane (5 mL/kg) سان ڪنن جي رگ ذريعي بيشمار ڪيو ويو ۽ پوءِ ان کي مقناطيس جي اندر رکيل لمبر علائقي سان گڏ 5 انچ قطر جي سرڪيولر مٿاڇري واري ڪوئل (GE ميڊيڪل سسٽم) تي مرڪز ڪيو ويو. ڪورونل T2-وزن ٿيل لوڪلائزر تصويرون (TR، 1445 ms؛ TE، 37 ms) حاصل ڪيا ويا لمبر ڊسڪ جي جڳھ کي وضاحت ڪرڻ لاءِ L3-L4 کان L5-L6 تائين. Sagittal جهاز T2-وزن وارا سلائسون ھيٺ ڏنل سيٽنگن سان حاصل ڪيون ويون آھن: تيز اسپن-گونج تسلسل 2200 ms جي ورجائي وقت (TR) سان ۽ ھڪڙو گونج ٽائيم (TE) 70 ms، ميٽرڪس؛ بصري فيلڊ 260 ۽ اٺ محرڪ؛ ڪٽڻ جي ٿولهه 2 ملي ميٽر هئي، خلا 0.2 ملي ميٽر هو.
آخري فوٽو ڪڍڻ کان پوء ۽ آخري خرگوش کي ماريو ويو، شمع، عضلات-سرايت، ۽ اين پي ڊسڪ هسٽولوجي امتحان لاء هٽايو ويو. ٽشوز کي 1 هفتي لاءِ 10٪ غير جانبدار بفر ٿيل فارملين ۾ مقرر ڪيو ويو، ethylenediaminetetraacetic acid سان decalcified، ۽ paraffin سيڪشن ڪيو ويو. ٽشو بلاڪ پيرافين ۾ شامل ڪيا ويا ۽ هڪ مائڪروٽوم استعمال ڪندي ساگيٽل حصن (5 μm ٿلهي) ۾ ڪٽي ويا. سيڪشن هيماتوڪسيلين ۽ eosin (H&E) سان داغ ٿيل هئا.
هر گروهه ۾ خرگوش مان انٽرورٽيبرل ڊسڪ گڏ ڪرڻ کان پوءِ، ٺاهيندڙ جي هدايتن ۽ ImProm II ريورس ٽرانسپشن سسٽم (Promega Inc. ، ميڊيسن، WI، USA). ريورس ٽرانسپشن ڪئي وئي.
RT-qPCR استعمال ڪيو ويو پرزم 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) ۽ SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ٺاهيندڙ جي هدايتن مطابق. پي سي آر جي رد عمل جو مقدار 20 μl هو ۽ ان ۾ 1.5 μl ٺهيل cDNA ۽ 0.2 μM هر پرائمر شامل هئا. پرائمر OligoPerfect ڊيزائنر (Invitrogen, Valencia, CA) پاران ڊزائين ڪيا ويا ۽ نانجنگ گولڊن اسٽيورٽ بائيو ٽيڪنالاجي ڪمپني لميٽيڊ (چين) (ٽيبل 1) پاران تيار ڪيا ويا. هيٺيون حرارتي سائيڪلنگ حالتون استعمال ڪيون ويون: شروعاتي پوليمريز ايڪٽيوشن قدم 94 ° C تي 2 منٽ، پوءِ 40 چڪر 15 s هر هڪ تي 94 ° C تي ٽيمپليٽ ڊينيچريشن لاءِ، 1 منٽ لاءِ اينيلنگ 60 ° C تي، ايڪسٽينشن، ۽ فلوروسينس. ماپ 1 منٽ لاء 72 ° C تي ڪيو ويو. سڀئي نمونا ٽي ڀيرا وڌايو ويو ۽ اوسط قدر استعمال ڪيو ويو RT-qPCR تجزيو لاء. ايمپليفڪيشن ڊيٽا کي استعمال ڪندي تجزيو ڪيو ويو FlexStation 3 (مالڪيولر ڊيوائسز، سني ويل، CA، USA). IL-4، IL-17، ۽ IFN-γ جين جو اظهار عام ڪيو ويو هو انڊوجنس ڪنٽرول (ACTB). ٽارگيٽ ايم آر اين جي لاڳاپا اظهار جي سطح 2-ΔΔCT طريقو استعمال ڪندي حساب ڪيو ويو.
ڪل پروٽين کي RIPA lysis بفر ۾ ٽشو هوموجنائيزر استعمال ڪندي ٽشوز مان ڪڍيو ويو (جنهن ۾ هڪ پروٽيز ۽ فاسفيٽس انابيٽر ڪاڪ ٽيل شامل آهي) ۽ پوءِ 13,000 rpm تي 20 منٽ لاءِ 4°C تي سينٽرفيوج ڪيو ويو ته جيئن ٽشو ملبي کي هٽايو وڃي. پروٽين جا 50 مائڪروگرام في لين تي لوڊ ڪيا ويا، 10٪ SDS-PAGE پاران الڳ ڪيا ويا، ۽ پوء PVDF جھلي ڏانهن منتقل ڪيا ويا. بلاڪنگ 5٪ نان فٽ خشڪ کير ۾ ڪئي وئي Tris-buffered saline (TBS) جنهن ۾ 0.1٪ Tween 20 1 h لاءِ ڪمري جي حرارت تي. جھلي کي خرگوش ضد اينٽي ڊيڪرين پرائمري اينٽي باڊي سان لڳايو ويو (تڪيل 1:200؛ بوسٽر، ووهان، چين) (تڪيل 1:200؛ بايوس، بيجنگ، چين) رات جو 4 ° سي تي ۽ ٻئي ڏينهن تي رد عمل ڪيو ويو؛ ثانوي اينٽي باڊي سان (بکري اينٽي خرگوش امونگلوبولين G 1:40,000 dilution تي) هارسريڊش پراڪسائيڊس (بوسٽر، ووهان، چين) سان گڏ ڪمري جي حرارت تي 1 ڪلاڪ لاءِ. مغربي بلٽ سگنلن کي ايڪس ري شعاع کان پوءِ chemiluminescent جھلي تي وڌندڙ chemiluminescence ذريعي معلوم ڪيو ويو. densitometric تجزيي لاءِ، بينڊ اسڪين سافٽ ويئر استعمال ڪندي بلٽ اسڪين ڪيا ويا ۽ مقدار جو اندازو لڳايو ويو ۽ نتيجن جو اظهار ڪيو ويو ته ٽارگيٽ جين اميونوريڪيٽيٽيٽيٽيٽيٽيٽي جي تناسب کي ٽوبولن امونوري ايڪٽيٽيٽي.
شمارياتي حساب ڪتاب SPSS16.0 سافٽ ويئر پيڪيج (SPSS، USA) استعمال ڪندي ڪيا ويا. مطالعي دوران گڏ ڪيل ڊيٽا جو اظهار ڪيو ويو مطلب ± معياري انحراف (مطلب ± SD) ۽ تجزيو ڪيو ويو هڪ طرفي بار بار قدمن جي تجزيي جي ويرينس (ANOVA) جي وچ ۾ فرق کي طئي ڪرڻ لاءِ. P <0.05 کي شمارياتي لحاظ کان اهم سمجهيو ويو.
اهڙيءَ طرح، MC جي جانورن جي ماڊل جو قيام آٽولوگس NPs کي vertebral جسم ۾ امپلانٽ ڪندي ۽ ميڪرواناتوميڪل مشاهدو، MRI تجزيو، هسٽولوجيڪل تشخيص ۽ ماليڪيولر حياتياتي تجزيا انساني MC جي ميڪانيزم کي سمجهڻ ۽ سمجهڻ لاءِ هڪ اهم اوزار بڻجي سگهي ٿو ۽ نئين علاج جي ترقي لاءِ. مداخلتون.
هن آرٽيڪل کي ڪيئن بيان ڪجي: Han, C. et al. موڊڪ تبديلين جو هڪ حيواني نمونو قائم ڪيو ويو آٽوولوگس نيوڪليس پلپوسس کي لمبر اسپائن جي سبچنڊرل هڏن ۾ لڳائڻ سان. سائنس Rep. 6، 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., and Boos, N. لمبر اسپائن جي مقناطيسي گونج اميجنگ: ڊسڪ جي هرنيائيشن ۽ برقرار رکڻ جي اڳڀرائي، اعصاب روٽ کمپريشن، آخري پليٽ جي غير معموليات، ۽ غير علامتي رضاکارن ۾ گڏيل اوستيوآرٿرتس جو منهن. . شرح. ريڊيولاجي 209، 661-666، ڊي آءِ: 10.1148/ريڊيالوجي.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, and Leboeuf-Eed, K. Modic تبديليون ۽ انهن جو تعلق ڪلينڪ جي نتيجن سان. يورپي اسپائن جرنل: يورپي اسپائن سوسائٽي جو سرڪاري پبليڪيشن، يورپي سوسائٽي آف اسپينل ڊيفارمٽي، ۽ يورپي سوسائٽي فار سروائيڪل اسپائن ريسرچ 15، 1312-1319، doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma، ايم، وغيره. lumbar vertebral endplates ۾ موڊيڪل تبديليون: وچين عمر جي مرد ڪارڪنن ۾ گھٽ پوئتي درد ۽ اسڪيوٽيڪا سان پکڙجڻ ۽ ايسوسيئيشن. اسپائن 32، 1116-1122، doi: 10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., and Dalinka, M. MRI of bone marrow change the end plate near the degenerative disease of lumbar spine. AJR. آمريڪي جرنل آف ريڊيالوجي 149، 531-534، doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
موڊڪ، ايم ٽي، اسٽينبرگ، پي ايم، راس، جي ايس، مساريڪ، ٽي جي، ۽ ڪارٽر، جي آر ڊيجنريٽو ڊسڪ بيماري: ايم آر آئي سان vertebral ميرو تبديلين جو جائزو. ريڊيولاجي 166، 193-199، doi: 10.1148/ريڊيالوجي.166.1.3336678 (1988).
موڊڪ، ايم ٽي، مساريڪ، ٽي جي، راس، جي ايس، ۽ ڪارٽر، جي آر اميجنگ آف degenerative ڊسڪ بيماري. ريڊيولاجي 168، 177-186، ڊي آءِ: 10.1148/ريڊيالوجي.168.1.3289089 (1988).
جينسن، ٽي ايس، وغيره. عام آبادي ۾ neovertebral endplate (Modic) سگنل تبديلين جا اڳڪٿي ڪندڙ. يورپي اسپائن جرنل: آفيشل پبليڪيشن آف يورپين اسپائن سوسائٽي، دي يورپي سوسائٽي آف اسپائنل ڊيفارمٽي، ۽ يورپي سوسائٽي فار سروائيڪل اسپائن ريسرچ، ڊويزن 19، 129-135، ڊي آءِ: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
البرٽ، ايڇ بي ۽ مننيچ، K. موڊڪ لمبر ڊسڪ هرنيشن کان پوء تبديليون. يورپي اسپائن جرنل: آفيشل پبليڪيشن آف يورپين اسپائن سوسائٽي، دي يورپي سوسائٽي آف اسپائنل ڊيفارمٽي ۽ يورپي سوسائٽي فار سروائيڪل اسپائن ريسرچ 16، 977-982، doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., and Kaapa, E. Modic type I تبديليون پيش ڪري سگھن ٿيون تيزيءَ سان ترقي پذير ڊفورميشنل ڊسڪ ڊيجريشن: ھڪڙو 1-سال جو امڪاني مطالعو. يورپي اسپائن جرنل 21، 1135-1142، doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
هو، ZJ، Zhao، FD، Fang، XQ ۽ فين، SW موڊڪ تبديليون: ممڪن سببن ۽ لمبر ڊسڪ جي تباهي ۾ حصو. ميڊيڪل هائيپوٿيسس 73، 930-932، doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
ڪروڪ، ايڇ وي اندروني ڊسڪ ڀڃڻ. 50 سالن کان مٿي ڊسڪ پروليپ مسئلا. اسپائن (فلا پا 1976) 11، 650-653 (1986).
پوسٽ جو وقت: ڊسمبر-13-2024